1)   Modello sperimentale in vivo: protocollo chirurgico.

Tale progetto prevede l’utilizzo di ratti con lesione del midollo spinale e tecniche chirurgiche di connessione della zona sovralesionale con i nervi periferici e con le radici motorie della cauda equina. Negli animali saranno esaminate le modificazioni inerenti la motricità, la sensibilità, la plasticità cerebrale valutando la rigenerazione degli assoni dei motoneuroni dell’area sottolesionale; la sensibilità dei neuroni sensitivi dell’area sottolesionale; le fibre nervose visceroeffettrici dell’area sottolesionale e quindi mettendo a punto un protocollo chirurgico standardizzato da attuare fin dal primo intervento di stabilizzazione, nei soggetti con trauma della colonna e del midollo spinale al fine di individuare una valida opzione terapeutica.

2)   Modello sperimentale in vivo: protocollo biologico.

Tale progetto prevede l’utilizzo di ratti con lesione del midollo spinale e inserimento di uno scaffold con cellule staminali e fattori neurotrofici. Anche in questi animali saranno esaminate le modificazioni inerenti la motricità, la sensibilità, la plasticità cerebrale valutando la rigenerazione degli assoni dei motoneuroni dell’area sottolesionale; la sensibilità dei neuroni sensitivi dell’area sottolesionale e le fibre nervose visceroeffettrici dell’area sottolesionale.

3)   Modello sperimentale ex vivo: Colture organotipiche di midollo spinale.

Con l’obiettivo di trovare nuove risposte terapeutiche al trauma spinale, la presente ricerca si propone di studiare la rigenerazione nervosa e funzionale del midollo spinale, in modelli sperimentali ex vivo di colture organotipiche di midollo di ratto (P0, P2, P4), tramite l’utilizzo di cellule staminali mesenchimali, scaffold fibrinici e fattori neurotrofici. Si andrà quindi a visualizzare nei seguenti preparati costituiti da sezioni di tessuto: [(a) singola slice di midollo spinale, (b) cocultura di due slices di midollo spinale, (c) cocultura di due slices rispettivamente di corteccia e midollo, (d) tratto cortico-spinale in vitro – corteccia, ponte, midollo], le modificazioni inerenti lo sprouting assonico valutando se il trattamento con cellule staminali mesenchimali in uno scaffold ricco di fattori di crescita può, modificando il microambiente, andare a migliorare la rigenerazione.